课程题目:（GB 4789.30-2016）单核细胞增生李斯特氏菌检验标准解读

课时：1小时03分15秒

主讲人：耿晓

课程介绍：

我们知道，在GB 29921-2013食品安全国家标准中规定了肉制品（包括熟肉制品和即食生肉制品）单核细胞增生李斯特氏菌不得检出。而在实际生活中，除了肉制品，单核细胞增生李斯特氏菌也容易在乳制品，如奶酪、冰淇淋、未灭菌的牛奶中检出，冷冻水产中也曾发现单核细胞增生李斯特氏菌。单核细胞增生李斯特氏菌耐低温，在2℃到42℃范围内均可生长。在GB 4789.30-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》标准中规定了食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验方法。虽然国标有所规定，但是在实际操作中还是会有很多的疑问。

比如：

在GB 4789.30-2016中规定：“取LB2二次增菌液划线接种于李斯特氏菌显色平板和PALCAM琼脂平板,于36°C±1°C培养24h~48h,观察各个平板上生长的菌落。”，没有规定具体的培养时间，在实际工作中一般培养48h，各种现象才能通过肉眼观察到。

GB 4789.30-2016 5.4.3对过氧化氢酶实验规定:“挑取纯培养的单个可疑菌落,进行过氧化氢酶试验,过氧化氢酶阳性反应的菌落继续进行糖发酵试验和MR-VP试验。”并没有指出具体的操作方法。

在对单核细胞增生李斯特氏菌进行检测的过程中，有的朋友会有疑问：进行二次增菌后为什么要做李斯特氏菌显色平板和PALCAM琼脂平板两种呢？单做一种不可以吗？答案是不可以，只做一种容易漏检。不同的培养基呈现不同的菌落特征，只有掌握了不同培养基的成分及其作用原理，才能更好的理解单核细胞增生李斯特氏菌检验方法，更好地应用于实践。在本次课程中对LB₁、LB₂增菌液、李斯特氏菌显色平板和PALCAM琼脂平板的成分和原理都进行了讲解。 

在GB 4789.30-2016中做单核细胞增生李斯特氏菌确证鉴定时还需要涉及染色镜检、动力试验、生化鉴定、溶血试验等，涉及的试验比较多，如果不注意，容易出现误差。

更多关于在单核细胞增生李斯特氏菌检验过程中需要注意的问题，请看课程《（GB 4789.30-2016）单核细胞增生李斯特氏菌检验标准解读》。

主要内容：

1. 单核细胞增生李斯特氏菌简介及危害

主要讲解李斯特氏菌属（Listeria）的发现、种类、致病性、单细胞增生李斯特氏菌生物学特征、容易污染的食品。

2. 检测标准解读及注意事项

2.1第一法 单核细胞增生李斯特氏菌定性检验

主要讲解了三种检测方法的适用范围、检测用到的试剂和材料、培养基和试剂、标准菌株、第一法的检验程序及每一步操作的注意事项、培养基的配比原理及不同培养基的菌落特征、不同的生化实验方法及结果鉴定和报告。

2.2 第二法 单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法

主要讲解了单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法的检验程序、注意事项及结果报告。

2.3 第三法 单核细胞增生李斯特氏菌MPN计数法

主要讲解了单核细胞增生李斯特氏菌MPN计数法的检验程序、注意事项及结果报告。

3. 单增李斯特氏菌的预防及处理

主要讲解了在实验操作及日常生活中如何预防单增李斯特氏菌、单增李斯特氏菌的易感人群、如何杀灭单增李斯特氏菌。

老师简介：

耿晓，从事食品检测工作近10年，擅长微生物、理化检测，现任某第三方检测机构微生物检测部主管。

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